時間：2022-11-07 
瀏覽量： 972 分光光度法的基本原理利用的是朗伯—比耳定律。
分光光度法：許多物質(zhì)的溶液具有顏色，有色溶液所呈現(xiàn)的顏色是由于溶液中的物質(zhì)對光的選擇性吸收所致。不同的物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)不同，對不同波長光的吸收能力也不同，因此具有其特有的吸收光譜。即使是相同的物質(zhì)由于其含量不同，對光的吸收程度也不同。
布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度成正比：A∝b 。
1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有成正比的關(guān)系：A∝ c 。
二者的結(jié)合稱為朗伯—比耳定律：當(dāng)一束平行的單色光通過均勻、非散射的稀溶液時，溶液對光的吸收程度與溶液的濃度及液層厚度的乘積成正比。
可見分光光度法的基本原理詳解：
1、當(dāng)一束強度為I0的單色光垂直照射某物質(zhì)的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強度降至I,則溶液的透光率T為:T=(I0-I)/I0
2、根據(jù)朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律:A=abc。
式中A為吸光度，b為溶液層厚度（cm），c為溶液的濃度（g/dm^3)， a為吸光系數(shù)。其中吸光系數(shù) 與溶液的本性、溫度以及波長等因素有關(guān)。溶液中其他組分（如溶劑等）對光的吸收可用空白液扣除。
3、由上式可知，當(dāng)溶液層厚度b和吸光系數(shù)a固定時，吸光度A與溶液的濃度成線性關(guān)系。在定量分析時，首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況（吸收光譜），從中確定最大吸收波長 ，然后以此波長 的光為光源，測定一系列已知濃度c溶液的吸光度A，作出A~c工作曲線。在分析未知溶液時，根據(jù)測量的吸光度A，查工作曲線即可確定出相應(yīng)的濃度。這便是分光光度法測量濃度的基本原理。
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